Test na koronawirusa z Wuhan to szybki immunologiczny test działający w oparciu o technikę chromatografii. Przeznaczony jest do jakościowego wykrywania przeciwciał IgM/IgG wytwarzanych we krwi na skutek infekcji koronawirusem SARS-CoV-2.
Koronawirusy to wirusy RNA, szeroko rozpowszechnione wśród ludzi, innych ssaków i ptaków. Znanych jest siedem gatunków koronawirusów wywołujących choroby u ludzi.
Cztery z nich – 229E, OC43, NL63 i HKu1 są powszechnie występującymi wirusami i zwykle powodują przeziębienie u osób z prawidłową odpornością.
Trzy pozostałe szczepy – koronawirus (SARS-CoV), koronawirus (MERS-Cov) i nowy koronawirus (SARS-CoV-2) są pochodzenia odzwierzęcego i mogą prowadzić do wystąpienia ciężkich infekcji dolnych dróg oddechowych takich jak zapalenie zapalenie płuc lub zapalenie oskrzeli. Szczególnie narażone na powikłania są osoby z obniżoną odpornością, innymi chorobami towarzyszącymi oraz osoby starsze.
Według najnowszych publikacji produkcja przeciwciał rozpoczyna się po ok. 7 dni dniach od ekspozycji na wirusa. Wyraźny wzrost przeciwciał IgM występuje po ok. 2 tygodniach od potencjalnego zakażenia. W tym czasie wytwarzane są przeciwciała w klasie IgG.
Poniższy wykres przedstawia czas powstawania przeciwciał po ekspzycji na wirusa SARS-CoV-2:
Źródło: https://twitter.com/trishgreenhalgh/status/1245975438176014336
Test służy do badania wstępnego (przesiewowego) co oznacza, że każdy wynik pozytywny powinien być potwierdzony alternatywną metodą.
Zasada działania testu:
Jest to jednoetapowy test immunochromatograficzny o przepływie bocznym. W teście wykorzystuje się anty-ludzkie przeciwciało lgM (linia testowa IgM), anty-ludzkie przeciwciało lgG (linia testowa lgG) i kozie anty-królicze przeciwciało IgG (linia kontrolna C).
Przeciwciała są unieruchomione na membranie nitrocelulozowej. Burgundowa koniugatowa podkładka zawiera sprzężone złoto koloidalne skoniungowane z rekombinowanymi antygenami SARS-CoV-2 (koniugaty SARS-CoV-2 i koniugaty królicze lgG-złoto).
Podczas przeprowadzania analizy próbka i bufor są dodawane do studzienki testowej. Jeśli w badanej próbce są obecne przeciwciała IgM i/lub IgG będą wiązać się z koniugatami SARS-CoV-2 tworząc kompleks antygen-przeciwciało. Powstały kompleks migruje przez membranę nitrocelulozową dzięki występowaniu sił kapilarnych. Kiedy roztwór osiągnie linię gdzie zostały immobilizowane przeciwciała (anty-ludzkiej IgM i / lub anty-ludzkie lgG) kompleks jest wiązany do przeciwciał i powstaje bordowy pasek, który jest potwierdzeniem reakcji wiązania. Brak barwnego paska w obszarze testowym oznacza brak reakcji wiązania kompleksu do immobilizowanych przeciwciał
Test zawiera kontrolę wewnętrzną (pasek C). Bordowy pasek powinien się pojawić niezależnie od wystąpienia innych pasków na teście i powstaje w wyniku powstania kompleksu koziego anty-króliczego przeciwciała IgG z koniugatem króliczego IgG ze złotem. Jeśli pasek testowy się nie pojawi, wynik testu jest nieprawidłowy i badany materiał powinien być przebadany ponownie z wykorzystaniem innego urządzenia.
Procedura wykonania testu:
Ograniczenia:
- Test służy do wykrywania przeciwciał tylko w próbkach pełnej krwi/surowicy/osocza. Za pomocą testu jakościowego nie można określić ani wartości ilościowej, ani współczynnika szybkości wzrostu przeciwciał.
- Podobnie jak w przypadku innych testów diagnostycznych, wyniki należy interpretować wyłącznie z uwzględnieniem innych informacji klinicznych, pod nadzorem lekarza.
- Jeśli wynik testu jest negatywny, a objawy kliniczne utrzymują się, zaleca się dodatkowe badanie przy użyciu innych metod klinicznych. Wynik ujemny nie wyklucza możliwości zakażenia wirusem SARS-CoV-2.
Czułość i specyficzność testu:
- czułość w klasie IgM – 88%, w klasie IgG – 96%
- specyficzność w klasie IgM/IgG – 100%
Test posiada certyfikat CE.
Do profesjonalnego użytku!
Publikacje:
https://www.nature.com/articles https://twitter.com/trishgreenhalgh/status/1245975438176014336
